在试验室中,对于某些动物的研究课题试验,往往需求先将动物组织进行研磨前处理,而手动研磨不容易到达预期的研磨效果,不能获取到合格的检测样品。试验室研磨动物组织,咱们能够借助专用的动植物组织研磨仪器,简便且有效,下面湖南研磨机生产厂家的工作人员就来详细介绍下动物组织研磨方法过程。
一、试验前的准备
1)在试验操作前,先将PBS缓冲液(磷酸缓冲盐溶液,phosphatebuffersaline)进行4℃预冷,然后准备若干冰块备用。
2)运用百分之75浓度的乙醇溶液对镊子、剪刀进行消毒处理,如果还需对动物组织进行RNA提取,还要运用酒精灯对镊子和剪刀进行再次消毒,以尽可能消除RNA酶。
3)所有试验耗材都应进行高温高压灭菌,以确保各种酶不会对后续试验产生影响。
4)将2ml离心管置于冰块上,并加入适量的PBS缓冲液,一般情况下,试验所需的组织匀浆的质量体积比为百分之10(即0.1g组织样本加入1ml液体)。
5)将需求进行研磨的组织样本从零下80℃的冰箱内取出,置于冰上,运用灭菌后的镊子和剪刀,将样本切成小块(每块分量不宜超越0.02g,总分量不宜超越0.2g),然后放入加好相应液体的离心管中,备用。
6)取出已经灭菌的氧化锆研磨球,依照每个离心管一颗的数量,将锆球放入离心管中。此过程需运用镊子进行该操作,而且尽量防止液体飞溅而导致样本污染。
二、组织研磨
1)将放入样品和锆球的离心管标记好编号,然后放入专用的研磨适配器中,盖好盖子,将适配器固定在研磨机上。
2)设置振荡频率为1000次/分钟,振荡时间为5分钟。
3)因为振荡过程中的撞击和摩擦,会产生很多热量,使得离心管温度升高,所以能够挑选具有低温控制功能的设备,或者将适配器放入液氮罐进行预冷冻,并减少研磨时间,防止高温对样本的损坏。
三、安排上清的吸取及保存
1)将研磨完成后的离心管放入低温环境下的高速离心机内,以4000rpm的速度离心30分钟。
2)将所得的上清液用移液器取出,转入至新的离心管内,并于零下80℃的环境长期保存。
关于试验室动物组织研磨的方法过程就为大家介绍到这里了,希望湖南研磨机生产厂家的工作人员讲解的内容对大家有所帮助!