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病毒样本的裂解过程

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病毒样本的裂解过程

发布日期:2022-03-08 作者:米淇 点击:

协和医院近期发布新冠病毒操作指南,供有条件的实验室参考。期间在病毒样本的裂解过程中多次使用了桌面离心机。本文中整理了部分桌面离心机供大家参考。

调速离心机.jpg定速离心机.jpg定速离心机.jpg

 以下为样本的裂解的参考过程 1、用1.5ml的无菌EP管,移液器移取560μl AVL裂解液,加入5.6μl Carrier RNA,加入140μl的已灭活的待提取核酸的待测样本,涡旋振荡15s,室温静止10min。将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物,防止污染。裂解完成后,加入560μl无水乙醇,振荡混匀15s,将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物,防止污染。

2、向离心柱加入裂解产物630μl,8000转离心1min,若离心机在生物安全柜之外,每次使用都需进行外表面消毒。更换新废液收集管,要从离心机中小心取出离心柱,将上层离心柱转移到新收集管中,继续将剩余裂解产物630μl加入离心柱中,若样本体积大于140μl时需重复此步骤,直到全部裂解产物都过柱离心,8000转离心1min,小心将离心柱转移到新的收集管中。 取500μl AW1加入离心柱中(注意,此处加样操作时务必将移液器吸头接触离心柱内壁缓慢加样),8000转离心1min。小心取出离心柱,更换新的收集管。取500μl AW2加入离心柱中,14000转离心3min,小心取出离心柱,更换新的离心柱上端收集管,置于离心机中使用最大转速离心1min,以确保将AW2中的残液完全离心干净。取无菌1.5mlEP管收集核酸,将离心柱上端小心放入1.5mlEP管中,取40-60μl的洗脱液AVE加入到离心柱中(注意:洗脱液应尽量全部覆盖住离心柱膜),用EP管管盖盖住离心柱,使用无菌剪刀剪去原离心柱管盖。室温静止1min,将其放入离心机中8000转离心1min,回收核酸。丢弃离心柱,EP管中即为获取的提取核酸,做好标记与登记。

 实验期间共涉及多次离心操作,而操作尽可能处于生物安全柜中进行,所以体积小的桌面离心机必不可少,本文梳理了部分桌面离心机供大家参考学习。


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